只照亮你正在看的那一层。光片(Light-Sheet / SPIM)以正交薄片照明大幅降低光毒性与光漂白,是胚胎、类器官与长期活体 4D 成像的理想选择。
传统共聚焦与落射荧光会照亮整个样本深度,大量离焦光既造成模糊,也带来不必要的漂白与损伤。光片显微镜用一束极薄的激光片,只激发与探测物镜焦面重合的那一层,再由正交方向的物镜成像——光毒性和背景同时下降,采集速度却更快。
只照明焦面,长时间活体成像对样本的累积损伤显著低于逐点扫描。
整面并行采集,适合心动周期、胚胎发育等快速动态过程。
光片(SPIM)与转盘共聚焦都走"薄层激发、相机并行采集"的路线,光毒性与漂白远低于逐点扫描。二者均以尼康 ECLIPSE Ti2 平台为光学与自动化底座,可按样本尺寸、分辨率与通量需求选择,也可同机组合。
CrestOptics X-Light V3 是转盘共聚焦(spinning disk confocal)扫描模块,可加装在尼康 Ti2 等正置 / 倒置平台上。它以针孔转盘实现光学层切,兼得共聚焦的层切能力与相机式的采集速度,光毒性低,常与光片方案并行使用,适合类器官、胚胎、斑马鱼等厚样本的高通量三维采集。
按样本尺寸、分辨率要求与时长选择。
| 方案 | 照明方式 | 分辨率 / 视野 | 最适合 |
|---|---|---|---|
| CrestOptics X-Light V3(转盘共聚焦) | 针孔转盘,点阵并行扫描 | 25 mm 大视野;层切由转盘针孔实现 | 类器官、厚样本的高通量三维采集 |
| diSPIM / Ti-diSPIM | 双视角正交光片 | 双视角下 XYZ 各向同性(40×/0.8 NA 约 300 nm) | 需要各向同性分辨率、又想保留 FRAP / 共聚焦 / TIRF 的实验 |
注:方案参数以尼康及合作厂商官方资料为准,如有变更恕不另行通知;实际配置以选型清单为准。
低光毒性带来的长时程与高通量优势。
长时间、低损伤地记录细胞分裂与形态发生。
整体活体、快速 4D,兼顾深部与速度。
大体积三维结构的光学切片与长期培养观察。
低光漂白使数天级时程成像成为可能。